제품 설명
인간 EGFR 29 유전자 돌연변이 검출 키트(Real-Time PCR) 사용 목적 이 테스트 키트는 체외 정성적 분석에 사용됩니다 EGFR의 엑손 18-21에서 일반적인 돌연변이 검출 인간 비소세포폐암 환자의 표본 유전자 (자세한 내용은 표 1 참조) 폐암은 인간의 건강을 심각하게 위협하며 세계적으로 암 사망의 주요 원인이 되고 있습니다. 폐암 환자 중 비소세포폐암은 약 80%를 차지합니다. eGFR은 현재 비소세포폐암 치료에 가장 중요한 분자량입니다. EGFR의 인산화는 종양 세포 성장, 분화, 침윤, 전이, 세포자멸사 방지를 촉진할 수 있습니다. 종양 혈관신생(Tumour angiogenesis) eGFR 티로신 키나아제 억제제(TKI)는 EGFR 자가인산화를 억제하여 종양 세포의 증식과 분화를 억제하고 종양 세포 자멸사를 촉진하며 종양 혈관형성 등을 감소시켜 종양 회수를 달성함으로써 EGFR 신호 전달 경로를 차단할 수 있습니다. 표적 치료[1] 많은 연구에서 EGFR-TKI의 치료 효능이 EGFR 유전자 돌연변이의 상태와 밀접한 관련이 있으며 특히 EGFR 유전자 돌연변이를 가진 종양 세포의 성장을 억제할 수 있음을 보여주었습니다[2~3]. EGFR 유전자는 7번 염색체(7p12)의 단부에 위치하며 전체 길이는 200KB이며, 28개의 엑손(exon)으로 구성됩니다. 돌연변이 영역은 주로 엑손 18-21에 있으며, 그 중 엑손 19의 대구로 된 746-753은 돌연변이의 약 45%를 차지하며, 엑손 21의 L858R 돌연변이는 약 40%-45%를 차지합니다[4]. "비소세포 폐암 진단 및 치료에 대한 NCCN 지침"에 따르면 EGFR-TKI 약물 투여 전에 EGFR 유전자 돌연변이 검사가 필요하다는 것이 분명합니다. 이 테스트 키트는 표피 성장 인자 수용체 티로신 키나아제 억제제(EGFR-TKI) 약물의 복용을 안내하고 비소세포폐암 환자를 위한 맞춤형 약물의 기반을 제공하는 데 사용됩니다. 이 키트는 비소세포폐암 환자의 EGFR 유전자 공통 돌연변이를 검출하는 데만 사용됩니다. 테스트 결과는 임상 참조용이며 개별 환자 치료의 유일한 기준으로 사용해서는 안 됩니다. 임상의는 환자의 상태, 약물 적응증, 반응 등의 치료 요인 및 기타 검사실 검사 지표를 함께 사용하여 검사 결과를 종합적으로 판단해야 합니다. 테스트 원리 이 검출 키트는 PCR 농축 용액, 암(증폭 불응성 돌연변이 시스템) 기술 및 TaqMan 프로브 결합 방법을 사용하여 L858R, 19del 및 기타 일반적인 EGFR 돌연변이를 감지합니다. PCR을 통해 돌연변이 부위를 농축하면 검출 분해능과 감도가 더욱 개선됩니다. TaqMan 프로브는 리포터 플루오포어 FAM 및 소광제 BHQ2로 라벨이 표시되어 있습니다. 프로브가 손상되지 않은 경우 리포터 그룹에서 방출된 형광 신호는 퀜칭 그룹에 의해 흡수됩니다. PCR 증폭 과정에서 Taq 효소의 5'-3' 엑소뉴클레아제 활성이 분할되어 탐침을 분해하므로 리포터 형광 그룹과 퀜칭 형광단이 분리되어 형광 모니터링 시스템이 형광 신호를 수신할 수 있습니다. PCR 농축 솔루션은 제한효소 소화를 통해 야생형 백그라운드 염기서열을 감소시키고 검출 분해능과 감도를 더욱 향상시킵니다. 암 방법의 특성: 3'-5' 엑소뉴클레아제 활성이 없는 Taq DNA 중합효소에서는 프라이머의 3' 말단을 구체적으로 인식할 수 있습니다. 프라이머의 3' 말단부가 완전히 일치하는 경우에만 돌연변이 부위의 단편이 정상적으로 증폭될 수 있습니다. 프라이머의 3' 끝이 일치하지 않을 경우 효과적으로 증폭할 수 없습니다. 따라서 이 방법을 사용하면 돌연변이 염기서열을 선택적으로 증폭할 수 있으며 TaqMan 프로브는 증폭된 제품과 결합하여 돌연변이의 타겟 염기서열을 식별합니다. 내부 대조군 반응 용액으로 선택된 검출 영역은 약 120bp의 인간 EGFR 유전자 중 엑손 2에 대한 상대적으로 보수적인 분절이며, 시약, DNA 품질 및 작동 자체의 품질 관리 역할을 합니다. DNA가 저하되더라도 내부 제어가 시스템에 실제로 반응할 수 있습니다. 유전자 내 DNA의 유효 양. 검출 시스템에는 dUTP, dNTP 및 Uracil DNA 글리코시라아제(UDG 효소)의 특정 비율이 포함되어 있으며, 이 효소(uracil-N-글리코시라아제 또는 ung 효소라고도 함)는 dUTP 제품을 포함하는 PCR을 중단시켜 PCR 오염을 효과적으로 방지합니다.
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