Honey용 스트렙토마이신 ELISA 테스트 키트

• 환경 보호: 네
• 인증: 범위
• 색: 화이트
• 분류: Food Diagnostic
• 기능: Food Testing
• 모델 번호.: KA01904H
• 세관코드: 38229000

제품 설명

제품 설명

경쟁 효소인 면역분석 키트
 스트렙토마이신의 정량적 분석  

배경
스트렙토마이신은 아미노글리코시드 항생제로 동물성 질병 치료에 광범위하게 사용됩니다. 신경독성과 신장 독성이 있기 때문에 동물 유래 식품에 잔류하는 것은 사람에게 해롭기 때문에 EU, 미국 및 중국에서 사용 중인 경우에만 엄격하게 통제됩니다. 현재 ELISA는 스트렙토마이신 약물의 관리 및 관리에 있어 일반적인 접근법입니다
이 키트는 ELISA 기술을 기반으로 한 약물 잔류 검출을 위한 새로운 제품으로 , 각 수술에서 45분 밖에 소요되지 않고 작동 오류 및 작업 강도를 상당히 최소화할 수 있습니다.  
2.시험 원리
이 키트는 직접 경쟁 ELISA를 기반으로 합니다. 마이크로티터 웰은 결합 항체로 코팅되어 있습니다. 시료의 스트렙토마이신 잔류물은 항체에 대한 마이크로티터 플레이트에 코팅된 효소 마커와 경쟁합니다. 효소 콘주게이트 추가 후 색소 모재가 사용되어 색상을 표시합니다. 시료의 흡수율은 표준 곡선과 비교하여 희석도를 곱한 후 시료의 스트렙토마이신 잔류물과 부정적인 관련이 있습니다. 이 잔여물은 시료의 스트렙토마이신 잔류량을 계산할 수 있습니다.
3.응용 프로그램
  이 키트는 조직(돼지고기, 닭고기, 간), 생선, 새우, 우유(생유, 우르크, 재구성된 우유, 탈수액우유, 우유 음료),  혈청, 분유(전유분유, 탈림 분유), 꿀, 로열젤리 등
4.교차 반응
스트렙토마이신................................................................ 100.0%
디하이드로스트렙토마이신................ …… 106%
스트렙토마이신 황산산염................................ 67%
네오마이신........ .................... 1% 미만
겐타마이신.................... ..... 1% 미만
카나마이신............................... 1% 미만
아미카신................................................ ............ 1% 미만
스펙티노마이신.............................................. 1% 미만
에이프라마이신................................................ 1% 미만

5.필요한 자료
5.1 장비
--- 마이크로티터 플레이트 분광광도계(450nm/630nm)
---- Homogenizer
보텍스 믹서
원심분리기
분석 균형(인덕턴스: 0.01g)
---- 눈금 피펫: 10ml
고무 피펫 전구
--- 폴리스티렌 원심분리 튜브: 2mL, 50ml
--- Micropipettes: 20μl-200μL, 100μL-1000μL
250μL - 다중 피펫  
5.2 시약
트리클로로아세트산 (AR)
--- 수산화나트륨 (AR)
탈염수
6.키트 구성 요소

1. 항원으로 코팅된 96개의 웰이 있는 마이크로티터 플레이트
2. 표준 용액 (6병 × 1ml/병)

0ppb, 0.05ppb, 0.15ppb, 0.45ppb, 1.35ppb, 4.05ppb

1. 표준 용액: (1ml/병) 1ppm
2. 농축 효소 콘주게이트  1ml.......red 캡
3. 효소 콘주게이트 희석제 10ml....... 녹색 뚜껑
4. 기질 용액 7ml  ............…흰색 뚜껑
5. 기판 용액 B  7ml............ 빨간색 뚜껑
6. 7ml 용액을 그만 두세요....................  노란색 뚜껑
7. 20 × 농축 세척액 40ml

 투명 캡

1. 2 × 농축 추출 용액 50ml

 ........................ 파란 뚜껑
7.시약 준비
용액  1:1% 트리클로로아세트산
트리클로로아세트산 1.0g을 탈이온수로 용해하고 완전히 혼합합니다.
용액  2:1.5% 트리클로로아세트산
트리클로로아세트산 1.5g을 탈이온수 100ml와 함께 녹인 후 완전히 혼합합니다.
해결책  3:0.1mol/L NaOH
100ml 의 탈이온수로 수산화나트륨을 0.4g로 용해하고 완전히 혼합합니다.
해결책  4: 추출 용액
2 × 농축 추출 용액을 1:1의 체적 비율로 희석하여 시료 추출에 사용합니다. 이 용액은 1개월 동안 4ºC에서 보관할 수 있습니다.
해결책 5: 세척액
20 × 농축 세척액을 탈이온수로 1:19의 부피 비율로 희석하여 플레이트를 세척하는 데 사용합니다. 이 용액은 1개월 동안 4ºC에서 보관할 수 있습니다.
8.샘플 준비
8.1 작동 전 주의 사항 및 주의 사항
(A) 실험 과정에서 원오프 팁을 사용하고 다른 시약을 흡수할 때 팁을 변경하십시오.
(b) 모든 실험 기기가 깨끗한지 확인합니다.  그렇지 않으면 분석 결과에 영향을 미칩니다.
(c) 준비된 검체는 즉시 사용해야 하며 실온에서 4시간 이상 보존하지 마십시오.
8.2 조직(돼지고기, 닭고기, 간)
-- 균질화된 조직 검체를 50ml 폴리스티렌 원심분리 튜브에 1.0 ± 0.05g의 무게를 낸 다음, 1% 트리클로로아세트산 2mL를 첨가하고(용액 1)  5분 동안 와류를 넣어 완전히 혼합합니다.
-- 분리를 위해 원심 분리합니다: 3000g/5분/주위 온도
-- 상등액 100ml를 채취하고, 30ml 의 0.1mol/L NaOH(용액 3)를 추가한 다음 870ml 의 추출 용액(용액 4)을 첨가하고, 30초간 와류를 추가하여 완전히 혼합합니다.
분석용으로 준비된 용액 50ml를 준비합니다.
희석 계수................... 30

8.3 아쿠아틱 제품
(1) 새우
-- 균질화된 새우 샘플 1.0 ± 0.05g을 50ml 폴리스티렌 원심분리 튜브에 넣은 다음, 1% 트리클로로아세트산 2mL를 첨가하고(용액 1)  5분 동안 와류를 넣어 완전히 혼합합니다.
-- 분리를 위해 원심 분리합니다: 3000g/5분/주위 온도
-- 상등액 100ml를 채취하고, 30ml 의 0.1mol/L NaOH(용액 3)를 추가한 다음 870ml 의 추출 용액(용액 4)을 첨가하고, 30초간 와류를 추가하여 완전히 혼합합니다.
분석용으로 준비된 용액 50ml를 준비합니다.
(2) 생선
-- 균질화된 생선 검체 1.0 ± 0.05g을 50ml 폴리스티렌 원심분리 튜브에 넣은 다음, 1% 트리클로로아세트산 2mL를 첨가하고(용액 1)  5분 동안 와류로 완전히 혼합합니다.
-- 분리를 위해 원심 분리합니다: 3000g/5분/주위 온도
 -- 상등액 100ml를 채취하고 900ml 의 추출 용액(용액 4)을 첨가한 다음 30초간 와류로 완전히 혼합합니다.
분석용으로 준비된 용액 50ml를 준비합니다.
희석 계수................... 30

8.4 우유 (원유, 우유통, 재구성 우유, 탈수액우유, 우유 음료),  혈청
2mL   폴리스티렌 원심분리 튜브에 우유 또는 혈청 검체 30ml를 첨가합니다.
  --- 870ml의 추출 용액(용액 4)을 추가하고 30초간 와류를 추가하여 완전히 혼합합니다.
분석용으로 준비된 용액 50ml를 준비합니다.
희석 계수................... 30

8.5 분유
-- 50ml 폴리스티렌 원심분리 튜브에 분유 분말 샘플 1.0 ± 0.05g을 넣은 다음 탈염수 10ml를 첨가합니다.  5 분 동안 와류하여 완전히 혼합합니다.
 -- 상등액 100ml를 채취하고 900ml 의 추출 용액(용액 4)을 첨가한 다음 30초간 와류로 완전히 혼합합니다.
분석용으로 준비된 용액 50ml를 준비합니다.
희석 계수................... 100

8.6여보
-- 1.0x0.05g 꿀 샘플을 50ml 폴리스티렌 원심분리 튜브에 넣은 다음 4mL의 탈염수를 첨가하고  검체가 완전히 용해될 때까지 5분 동안 보텍스합니다.
 -200ml의 깨끗한 용액을 먹고 , 600ml의 추출 용액(용액 4)을 첨가하고, 30초간 와류로 완전히 혼합합니다.
분석용으로 준비된 용액 50ml를 준비합니다.

희석 계수................... 20

8.5  로얄 젤리
-- 50ml 폴리스티렌 원심분리기 튜브에 로열젤리 샘플 1.0 ± 0.05g을 넣습니다.
1.5% 트리클로로아세트산 3ml(용액 2)를 첨가하고 5분 동안 보텍스한 다음 실온에서(20-25ºC) 3000g로 5분 동안 원심분리합니다 .
 상등층 100ml를 (유동성 물체를 피하십시오) 가지고 110ml 의 0.1mol/L NaOH (용액  3)와 섞은 다음 pH를 6-8로 조정하고 790ml 의 추출 용액(용액 4)을 첨가하고 1분 동안 보텍스한 후 완전히 혼합합니다.
분석용으로 준비된 용액 50ml를 준비합니다.
참고: 이 방법은 배경 효과가 2ppb일 수 있으며, MRL에 따른 샘플 결정에는 영향을 미치지 않습니다.

희석 계수................... 30

9.분석 프로세스
9.1 분석 전 주의 사항
9.1.1 모든 시약과 마이크로웰이 모두 실온(20-25ºC)에 있는지 확인하십시오.
9.1.2 사용 후 즉시 모든 REST 시약을 2-8ºC로 되돌립니다.
9.1.3 마이크로웰을 정확하게 세척하는 것은 분석 과정에서 중요한 단계입니다. 이는 ELISA 분석의 재현성에 중요한 요소입니다.
9.1.4 배양 중 빛을 피하고 마이크로웰을 덮으십시오.
9.2 분석 단계
9.2.1 모든 시약을 실온에서(20-25ºC) 30분 이상 빼내고 사용 전에 부드럽게 흔듭니다.
9.2.2 전자레인지에서 데우는 데 필요한 전자레인지를 꺼내 놓고 나머지는 즉시 2-8ºC의 지퍼백에 넣어 주십시오 .
9.2.3 농축 세척액과 농축 추출 용액을 사용하기 전에 다시 데워야 합니다.
9.2.4 숫자: 모든 마이크로웰 위치에 번호를 매기기를 하고 모든 표준 및 샘플을 복제해서 실행해야 합니다. 표준 및 샘플 위치를 기록합니다.
9.2.5 표준 용액/샘플 추가: 50µl 표준 용액 또는 준비된 샘플을 해당 웰에 추가합니다.
9.2.6 농축 효소 콘주게이트 희석: 농축 효소 콘주게이트와 효소 콘주게이트 희석액을 1:10의 체적 비율로 혼합합니다(예 농축 효소 콘주게이트 0.5ml + 효소 콘주게이트 희석제 5ml), 완전히 혼합합니다(이 혼합물은 보존이 불가능합니다. 즉시 사용하십시오).
9.2.7 희석된 효소 콘주게이트(9.2.6) 추가: 희석된 효소 콘주게이트 50µL를 각 웰에 추가하고 플레이트를 수동으로 흔들어 혼합한  다음  덮개와 함께 25ºC에서 30분 동안 배양합니다.
9.2.8  세척: 뚜껑을 부드럽게 제거하고 우물에서 액체를 부은 다음 4   -5회 10초 간격으로 250µl 희석 세척액(용액 5)으로 마이크로웰을 헹구십시오. 흡수제로 잔류 물을 흡수합니다(사용하지 않은 팁으로 남은 공기 방울을 제거할 수 있음).
9.2.9  컬러: 각 웰에 50µl 의 용액 A 와 50µl 의 용액 B 를 추가합니다. 플레이트를 수동으로 흔들어서 부드럽게 혼합한 후 커버가 있는 상태에서 25ºC에서 15분 동안 배양합니다(12.8 참조).
9.2.10  측정: 각 웰에 정지 용액을 50µl 추가하십시오. 플레이트를 수동으로 흔들어서 부드럽게 혼합하고 450nm에서 흡광도를 측정합니다(이중 파장이 450/630nm인 경우 측정 권장). STOP 용액을 추가한 후 5분 내에 결과를 읽으십시오.)
결과
10.1 % 흡광도
표준물질과 시료에 대해 얻은 흡수율 값의 평균값을 첫 번째 표준(표준 영점)의 흡수율 값으로 나눈 다음 100%를 곱합니다. 따라서 0 표준은 100%와 동일하며 흡수율 값은 백분율로 표시됩니다.
   
B-- 표준(또는 샘플)의 흡광도
  0-표준 B0-흡광도
10.2 표준 곡선
표준 곡선을 그리려면 표준물질의 흡수율 값을 y축으로, 스트렙토마이신 표준 용액(ppb)의 농도를 반로그로 x축으로 지정합니다.
--- 보정 곡선에서 판독할 수 있는 각 샘플의 스트렙토마이신 농도(ppb)에 따라 각 샘플의 해당 희석 계수를 곱하고 실제 시료 농도를 구합니다.
주의 사항:
   특별 소프트웨어는 요청에 따라 제공될 수 있는 모든 데이터 분석을 위해 개발되었습니다.  
11.감도, 정확도 및 정밀도
테스트 감도: 0.05ppb
감지 제한
조직........................ …………… 1.5ppb
생선과 새우.................... …………… 1.5ppb
우유, 혈청....................................... 1.5ppb
분유....................... ……… 5ppb 허니.................... …………………… 1ppb
로얄 젤리................................ 1.5ppb
정확성
티슈/생선/새우/세럼/허니/로얄 젤리.......................................................................................................... 90 ± 15%
우유/분유.................................................................................. 100 ± 30%
정밀
ELISA 키트의 변동 계수는 10% 미만입니다.

12.알림
12.1 표준값과 표본의 흡수율 평균값은 시약과 표본이 실온(20-25ºC)으로 조절되지 않으면 감소합니다.
12.2 재현성에 실패하지 않도록 마이크로웰을 말려서 단계를 진행하면 마이크로웰스 거치대를 누른 후 즉시 다음 단계를 밟을 수 있습니다.
12.3.  사용하기 전에 각 시약을 부드럽게 흔듭니다.
12.4.0.5m H2SO4 용액으로 피부 관리용액에 닿지 않도록 하십시오.
12.5 키트를 사용하지 마십시오. 서로 다른 배치의 시약을 교환하지 마십시오. 감도가 떨어집니다.
12.6 ELISA 키트를 2-8ºC에서 보관하십시오. 얼지 마십시오. 밀봉 REST 마이크로웰 플레이트는 표준 시료에 직사 광선을 피하며 무색 발색원성 시약은 빛에 민감합니다.
12.7 기질 용액은 색상이 변하는 경우 버려져야 합니다. 제로 표준의 흡수율 값(450/630nm)이 0.5 (A450nm < 0.5)보다 작으면 시약이 불량해질 수 있습니다.
12.8 색조가 용액 A와 용액 B를 추가한 후 15분 이상 반응해야 하며, 색조가 너무 밝아서 판별할 수 없는 경우 배양 시간을 20분으로 연장할 수 있습니다. 반대로, 배양 시간을 적절하게 단축하지 마십시오.
12.9 최적의 반응 온도는 25ºC입니다. 온도가 높거나 낮으면 감도와 흡광도 값이 변경됩니다.
13.보관
     보관 조건: 2-8ºC
보관 기간: 12개월

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