플루오로퀴놀론 ELISA 테스트 키트

• Environmental Protection: Yes
• Certification: REACH
• Color: White
• Classification: Food Diagnostic
• Function: Food Testing
• 모델 번호.: KA00903H
• 세관코드: 38229000

제품 설명

 

제품 설명

경쟁 효소인 면역분석 키트
플루오로퀴놀론 정량 분석

배경
퀴놀론(QNS)은 모두 DNA 자이라아제의 억제로 작용하며 DNA 재결합 반응을 간섭하여 작용을 없애는 합성 항생제 등급입니다. 교분해효소는 프로핵테의 필수 효소이지만 진핵테에서는 발견되지 않으므로 이러한  항생제의 이상적인 표적이 됩니다. 수의학 관행의 경우, 호흡기 및 소화관 감염 치료를 위해 소 주입을 통해 관리하고, 돼지에 대해 근육이 주입되며, 소, 돼지, 닭에 대해 구두로 투여합니다.
2.시험 원리
이 ELISA 키트는  경쟁 효소면역분석법의 원리에 따라 퀴놀론 검출을 위해 설계되었습니다 . 마이크로티터 웰은 캡처 BSA 결합 항원으로 코팅되어 있습니다. 시료의 퀴놀론(quinolones)은 항체에 대한 마이크로티터 플레이트에 코팅된 항원과 경쟁합니다. 효소 콘주게이트 추가 후 발색체 기질이 사용되며 분광광도계로 신호를 측정합니다.  흡수는 시료의 퀴놀론 농도에 반비례합니다.
3.응용 프로그램
이 키트는 꿀에 포함된 퀴놀론 정량 및 정성적 분석에 사용됩니다 .
4.교차 반응
노플록사신(NOR).................... …..... 100%
페플록사신........................................................................................ 110%
오플록사신(OFL)............................ ..... 100%
로롬플록사신(Lomefloxacin, LOM)...... ............ 90%
디플록사신(DIF).................................................... 120%
레보플록사신........................................................................... 110%
엔로플록사신(ENR)............................................ 130%
시프로플록사신(CIF)....................... ……………… 100%
사라플록사신(SAR)................................................ ……..120%
마보플록사신............................................................................................ 90%
파즈푸플록사신.......................................................... 80%
플럼킨(독감).................... 95%
에노사신(ENO)............... ...... 100%

단플로록사신(Dan)........................................................ 90%
옥시노산(OXO)............ ..... 100%
플라록사신.................... 45%
시파플록사신.................................................................................... 8%
5.필요한 자료
5.1 장비
-- 마이크로티터 플레이트 분광광도계(450nm/630nm)
-- 로터리 증발기 또는 질소 건조 기기
--- 홈고원제/구배자
--- 셰이커
-- 와류 믹서
원심분리기
분석 균형(인덕턴스: 0.01g)
--- 눈금 피펫: 10ml
고무 피펫 전구
-- 메스 플라스크는 100ml, 400ml, 500ml입니다
유리 테스트 튜브: 10ml
-- 폴리스티렌 원심분리 튜브: 2mL,  15ml, 50ml
-- 마이크로피펫: 20ul-200uL,
100uL-1000ul, 250ul-multipette
5.2 시약
탈염수
6.키트 구성 요소

1. 항원 코팅 처리된 마이크로티터 플레이트,  96웰
2. 표준 용액 × 6병: (1ml/병)

0ppb, 0.1ppb, 0.3ppb,  0.9ppb,  2.7ppb,  8.1ppb

1. 표준 용액:  1ml, 100ppb
2. 농축 효소  콘주게이트 (1ml)……빨간 캡
3. 항체 용액(7ml)….....................green 캡
4. 기판 용액 A(7ml)............ 화이트 캡
5. 기판 용액 B(7ml)............ 빨간색 뚜껑
6. 용액을 그만 마시길 (7ml)................…노란색 뚜껑
7. 20 × 농축 세척액(40ml)

 투명 캡
추출 용액(50ml).................................................... 블루 캡  
시약 준비
7.1 세척액: 20 × 농축 세척액을 탈이온수(1:19)로 희석하여 플레이트를 세척하는 데 사용합니다. 세척액은 4ºC에서 한 달 동안 사용할 수 있습니다.
8.시료 준비
8.1  작동 전 주의 사항 및 주의 사항
(A) 실험 과정에서 원오프 팁을 사용하고 다른 시약을 흡수할 때 팁을 변경하십시오.
(b) 모든 실험 도구가 깨끗한지, 필요하다면 정제할 것인지, 그 결과를 간섭하지 않는지 확인하십시오.
(c) 미처리 검체를 냉동에 보관합니다.
(d) 처리된 검체는 혈청을 제외하고 2-8ºC에서 24시간 동안 검게 보관할 수 있습니다.
(e) 효소 콘주게이트는 사용하기 전에 신선하게 준비해야 합니다.
8.2 여보
-- 10ml 튜브에 꿀 1.0 ± 0.05g을 넣습니다.
탈염수 4mL 를 첨가하고, 5분 동안 와류하여 완전히 용해합니다.
용존 샘플 500ul, 추출 용액 500ul, 보텍스한 3분
--- 분석용 웰 당 50uL를 사용합니다.
 9.분석 단계
9.1 분석 전 주의사항:
9.1.1 재가열될 때까지 30분 이상 시약과 마이크로웰을 실온(20-25ºC)으로 유지합니다.
9.1.2 사용 후 즉시 모든 REST 시약을 2-8ºC로 되돌립니다.
9.1.3 마이크로웰을 정확하게 씻는 것은 분석 과정에서 중요한 요소이며 , ELISA 분석의 재현성을 위한 중요한 요소입니다
9.1.4 배양 중 마이크로웰을 덮습니다.
9.2 분석 프로세스
9.2.1 모든 시약을 30분 이상 실온에서(20-25ºC) 넣은 후 사용하기 전에 부드럽게 흔듭니다.
9.2.2 전자레인지에서 데우는 데 필요한 전자레인지를 꺼내 지퍼백에 넣고 즉시 2-8ºC에서 보관합니다.
9.2.3  숫자: 모든 표준 물질과 샘플을 복제할 수 있도록 충분한 수의 웰을 마이크로웰 홀더에 삽입하십시오. 표준 및 샘플의 위치를 기록합니다.
9.2.4 시료/표준 추가:  각 표준 용액 또는 준비된 샘플을 중복 웰에 50µl 추가.
9.2.5 효소와 항체 혼합 용액: 사용 용도에 따라 1:10의 체적 비율로 농축 효소 콘주게이트를 항체 용액과 희석합니다(1개의 농축 효소 콘주게이트 + 10개의 폴드 항체 용액). 완전히 혼합합니다(이 용액은 즉시 사용해야 함).
9.2.6  효소 및 항체 혼합물 추가: 각    웰에 50µl 효소 콘주게이트 및 항체 혼합물을 즉시 첨가하고  부드럽게 혼합한 후 커버가 있는 25ºC에서 30분 동안 배양합니다.
9.2.6 세척: 뚜껑을 부드럽게 제거하고 액체를 정결하게 한 다음 10초 간격으로 250µl 희석 세척액으로 마이크로웰을 세척합니다. 전자레인지에 있는 홀더를 흡수성 용지에 대고 세게 거꾸로 눌러 웰에서 액체를 완전히 제거합니다(4-5회 반복).
9.2.7 컬러: 각 웰에 50µl 용액 A와 50µl 용액 B를 추가합니다. 부드럽게 혼합하고 커버가 있는 25ºC에서 15분 동안 배양합니다 (12.8 참조).
9.2.8 측정: 각 웰에 50µL의 정지 용액을 추가합니다. 공란과 450nm에서 흡광도를 부드럽게 혼합하고 측정합니다 (이중  파장이 450 / 630nm인 경우 권장 측정치입니다. 용액을 추가한 후 5분 내에 결과를 읽으십시오).  
결과
10.1% 흡광도
표준물질과 시료에서 얻은 흡수율 값의 평균값을 첫 번째 표준(표준 영점)의 흡수율 값으로 나눈 다음 100%를 곱합니다.
   =
B-- 표준 또는 시료의 흡광도
0-표준 B0-흡광도
10.2 표준 곡선
표준 곡선을 그리려면 표준값을 y축으로, 표준물질 농도(ppb)를 x축으로 대수학적으로 표시합니다.
 -- 보정 곡선에서 판독할 수 있는 각 샘플의 퀴놀론 농도(ppb)에 뒤따른 각 샘플의 해당 희석 비율을 곱하고 실제 시료 농도를 구합니다.
주의사항:  결과 계산을 위해 특별 소프트웨어가 개발되었으며  요청 시 제공됩니다.
시료 희석 비율:  

꿀 : 10
11.감도, 정확도 및 정밀도
테스트 감도: 0.1ppb
샘플 검출 한계:
꿀............................... 1ppb
정확도:
꿀................................ 100% ± 20%
정밀:
 ELISA 키트 CV 모두 10% 미만
12.알림
12.1 표준값과 표본의 흡수율 평균값은 시약과 표본이 실온(20-25ºC)으로 조절되지 않으면 감소합니다.
12.2 마이크로웰을 말려서 반복이 제대로 되지 않도록 하고 마이크로웰을 꽂은 후 바로 다음 단계를 작동하십시오.
12.3 균질액을 섞고 플레이트를 적절하게 오자십시오. 12.4 피부에 닿는 정지 용액을 피하세요. 2M입니다
     H2SO4
12.5 키트를 사용하지 마십시오. 다른 배치의 시약을 교환하지 마십시오. 그렇지 않으면 감도가 떨어집니다.
12.6 ELISA 키트를 2-8ºC에서 보관하십시오. 모든 배양 중에는 직사광선을 피하십시오. 마이크로티터 판을 덮는 것이 좋습니다.
12.7 기판 용액이 색상을 바꿔도 버려져야 합니다.    0 표준값의 흡광도 값(450/630nm) 이 0.5(A450nm < 0.5)보다 작으면 시약이 악화될 수 있습니다.
12.8 색조 반응은 용액 A와 용액 B를 추가한 후 10-15분 후에 필요합니다. 그러나  컬러가 너무 밝아서 판별할 수 없는 경우 배양 시간 범위를 20분으로 연장할 수 있습니다.  25분을 초과하지 마십시오.  반대로, 배양 시간을 적절히 단축하십시오.
12.9 최고 반응 온도는 25ºC입니다. 온도가 너무 높거나 너무 낮으면 감도와 흡수율 값이 변경됩니다.
보관 조건 및 보관 기간
보관 조건: 2-8ºC
보관 기간: 12 개월

상세 사진

 

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